第203章 孙教授：打不过能加入吗？
手术顺利结束。
真是千篇一律的结局。
真是，最好的结局。
江河洗手，回到更衣间。
从柜子里拿出沙糖橘，剥开。
再尝一口，还是好吃的。
一点都不涩，但他不由得想起当年，好涩的当年。
……
小江同志在京交换学习的时候，在医院里被前辈们天天指着鼻子臭骂。
好在无论多晚回到家，家中总有沈老师在等他。
好温柔的沈老师呀。
会放好热水，加入一些艾草，说是自学的中医料包，为了给小家省钱。
然后她会半蹲在地上，替江河脱去袜子，再把他的脚浸入热水中。
假装嫌弃的去洗洗手，再绕到床上，给江河按摩。
软软的声音在耳边响起：
“江医生，今天辛苦啦。”
江河一直觉得媳妇在这一块就是纯魅魔。
明明她没有勾引的想法，只是单纯的想对自己好，但却风情万种。
沈老师的按摩手法也很专业。
问她跟谁学的，她说常常给奶奶按，练出来的。
江河：赞美奶奶。
按了一会儿之后。
江河便仰起头，看向沈钰的脸，忍不住捉住她的手腕，轻声问：“媳妇，你怎么对我这么好呀？”
沈钰会笑盈盈地说：“因为我钟意你呀。”
他笑着捏捏她的脸颊：“又学粤语啦？”
沈钰嘿嘿一下，下巴抵着他的额头，说道：“系呀，我怕我不会说粤语，咱爸咱妈到时候不喜欢我……”
江河忍不了了，猛地转过身就要去吻她。
“哎呀别闹，泡脚呢……”
沈钰笑着躲闪，就是不给亲。
江河啧一声，直接将她扑倒在床上。
被按在床上，沈钰不再躲了，无处可躲。
江河双臂撑在她耳畔。
沈钰也静静地回望。
两人的眼睛里，是满满当当、快要溢出来的爱意。
对视了片刻，沈钰勾住江河的脖颈，吻了上来。
江河也熟练地把手抚上。
吻了好一会儿之后，沈钰微微喘着气退开半寸，点了点江河的嘴唇，心疼道：“你的嘴巴好干啊，起皮了都。”
说着，她侧过身，从床头柜上拿过一瓣沙糖橘。
将橘肉含进嘴里，咬破果肉，重新凑上前，将鲜甜的橘子汁水，嘴对嘴喂给他。
太涩了。
江河这还能忍得住？
立刻将沈老师的睡裙掀到了腰际——
咚咚。
有人敲门。
江河回过神来，见杨煦在外面，手里也拿着个橘子在剥。
老师看见江河盯着橘子不语。
便把手里剩下的半个递给江河：“吃不？”
江河叹了口气：“行。”
“我跟阿婆说了，手术很成功，肿瘤切得很干净，胆肠吻合也很顺利，人已经平安送去ICU观察了，老太太一听，差点要跪下，被护士长拉住了，这老赵一家，不容易啊。”
江河不语，一味吃橘。
杨煦想了想，道：“江河，你在此地不要走动，我想去买点橘子。”
江河：“？”
一时间摸不清楚老师是在占便宜还是讲真的。
杨煦继续说：“咱们科室最近大家都挺辛苦的，连轴转，我想着，干脆直接找老太太买个几百斤橘子，给科室里的医生护士都分分，权当是发点福利。”
江河听懂了，温和道：
“行，老师，顺便帮我也买些吧，我带回学校去，给班上的同学分点，项目组那边最近熬夜多，正好也给大家尝尝。”
杨煦笑了：“你小子，现在是独立医疗组长，拿副高待遇了，起码买两百斤。”
“好，没问题，学校人多，总分的完。”
医院冷冷的灯光下。
两人是满满的善意。
“说起项目组……”杨煦咳嗽一声，“咱们今天也没别的手术安排了，正好，去一趟学校？”
江河歪头：“去学校干嘛？”
“去看看你们那个miRNA早筛项目做得怎么样了啊，作为你的导师，我得时刻关注你的科研进度，再说了，买橘子的事也得跟他们说一声，顺便……带几个现成的橘子给他们尝尝。”
江河心中一乐。
看项目是假，送橘子是假。
想去见王晓晴教授才是真！
“好的老师，走吧。”
……
去南医大的路上，杨煦亲自开车。
“江河啊，王教授他们在实验室，有没有什么难点？”
江河随口答道：“刚卡在RNA提取这一步，血清里的游离核酸含量太低，蛋白又多，Trizol法很容易带入杂质，A260/280的比值一直上不去。”
“那你们现在是怎么解决的？”杨煦开始套话。
江河笑了笑，心中了然，便详细地讲解了一下：
“双重氯仿抽提，加糖原共沉淀，第一次加氯仿离心后，吸取上清液，移入新的离心管，再加一次等体积的氯仿进行第二次离心，这样可以最大限度去除蛋白污染，浓度不够的问题，就在加异丙醇沉淀前，补5微升5mg/ml的糖原作为共沉淀剂。”
杨煦连连点头。
半小时后，两人提着一袋橘子，来到学校实验室。
听到推门声，众人抬起头。
“杨主任？”
“老大？”
“来来来，大家先停一下手里的活，休息十分钟。”杨煦热情地招呼着，“这是我跟江河特意给你们带的沙糖橘，尝尝，甜得很。”
众人闻言，纷纷围了过来。
王晓晴也拿起一个橘子剥开。
杨煦状似自然的站到王晓晴旁边。
随口说道：
“我看你们这进度，是在做RNA提取的最终洗涤吧？”
王晓晴点头：“嗯，江河刚定下的方案，这批是用双重氯仿法跑的，还在等离心结果。”
“双重氯仿法，是个好思路。”
杨煦道：“血清样本和组织样本不一样，Trizol试剂用在血清上，最大的痛点就是蛋白含量超标，你们在吸取水相上清液的时候，稍有不慎就会把中间的蛋白层带出来，这会导致下游逆转录直接失败。”
“所以，牺牲第一次的取液量来换取纯度是极其必要的，把第一次吸出的上清液，再加一次等体积的氯仿，剧烈震荡后进行二次离心，这样一来，蛋白杂质基本就被洗干净了。”
几个学生都纷纷点头。
杨教授不愧厉害。
说的跟江河说的一模一样。
王晓晴也有些意外地看向杨煦：
“杨主任，你对基础分子实验也这么有研究？”
杨煦故作谦虚：“医学是不分家的嘛，临床和基础本来就是相辅相成的，再说了，你们这套方案，为了补足二次抽提带来的浓度流失，肯定在沉淀前加了东西吧？”
王晓晴再度惊讶，乖巧点头：“确实。”
“5微升，5mg/ml的糖原，糖原作为共沉淀剂，不影响下游的PCR扩增，还能让微量的RNA在管底形成肉眼可见的沉淀团块，我说的对吧？”
“对的对的。”
王晓晴觉得杨煦有点厉害了，稍有些崇拜。
杨煦心里乐开了花，脸上云淡风轻。
他转过头，看了江河一眼，挑了挑眉毛。
江河默默地剥开一个橘子，把目光偏向窗外，看天。
——想装就装吧，谁让你是我老师呢。
休息时间结束。
实验重新运转。
接下来的环节是沉淀后的无水乙醇洗涤。
王晓晴准备亲自操作移液枪。
杨煦在她旁边轻声提醒，美其名曰指导：
“王教授，样本沉淀物很小，洗涤的时候，枪头最好贴着管壁对侧下去。”
“我知道。”
“吸的时候慢一点，拇指控制好二挡的回弹力度。”
“杨主任，你挡着我光了。”
“哦哦，抱歉，习惯性盯紧细节。”
就在这时，许久未见的孙长明教授来串门了。
“哎哟，都在忙呢？”
他今日看着心情不错，背着手，春风得意的。
目光扫过全场，看见杨煦也在，笑意更深：“老杨也在啊？怎么，今天医院不忙啊？”
杨煦脸上的笑容一下就消失了，道：“来看看项目进度，你来干什么？”
“我？我是来分享学术经验的。”
孙长明悠然道：“你们还在搞RNA提取？设备用得还习惯不？”
杨煦冷漠：“挺好的，不劳孙教授费心。”
孙长明嘿嘿一笑：“老杨啊，其实我今天过来是想说，我们研究所那边，消化道肿瘤的RNA提取纯化，刚刚取得了重大突破。”
此话一出，实验室里的众人都抬起了头。
孙长明：“大家都知道，消化液和血清里的RNA极其容易降解，我们团队花了一个月的时间，反复调整试剂配比，终于摸索出了一套极限纯化的办法。”
王晓晴好奇道：“噢？说来听听。”
孙长明坐直了身体，开始长篇大论：
“最重要的就是放弃传统的Trizol，我们采用了硅胶膜离心柱法结合多重酶解，首先，在裂解阶段加入高浓度的蛋白酶K，56度水浴消化一个小时，然后，利用离心柱进行过柱，为了洗掉多糖杂质，我们专门配制了一种含高浓度盐酸胍和异丙醇的洗脱液，反复洗脱三次。”
“虽然这个流程耗时要四个多小时，成本也高，但纯度那是没得说，A260/280的比值，我们稳定做到了1.75以上！这在当前的液体活检领域，绝对是领先水平！”
说完，孙长明往椅背上一靠，端起桌上的水杯喝了一口，等待着惊叹声。
1.75的纯度，在08年，确实值得骄傲。
然而，实验室里众人的表情都怪怪的。
大家面面相觑，好像不知道该说什么好。
孙长明皱了皱眉：“怎么？没听懂？也是，这套酶解过柱的体系确实复杂了点，你们刚接触湿实验，慢慢来……”
“不是，孙教授。”陈浩默默地举起了手，“我有个问题。”
“你说。”孙长明点点头。
陈浩语气真诚地发问：“既然是要解决蛋白污染和降解的问题，为什么一定要用蛋白酶K去水浴消化一个小时，还要花那么高成本去买离心柱反复洗脱呢？”
孙长明愣了一下：“不用这些，你怎么去蛋白？怎么提纯？”
陈浩理所当然地回答：“双重氯仿抽提，加糖原共沉淀啊，我们老大提出来的这个方法，牺牲点第一次的上清液体积，再加一次氯仿离心，蛋白就全沉下去了，然后补5微升糖原把RNA析出来，整个流程下来四十分钟就搞定了，效果很好呀，为什么要搞得像你那么复杂？”
孙长明：“？”
反应了半天后，孙长明抗拒道：“不对，氯仿确实能去蛋白，但你抽提两次，水相里的RNA早就流失得七七八八了，就算加了糖原，浓度也绝对达不到下游要求，纯度就更别提了，能过1.5都算你们运气好。”
“可是……”蔡卓群在旁边忍不住插嘴。
“没什么可是的，科研需要的是严谨，你们用这种糙办法，跑出来的数据全都是假阳性或者直接假阴性。”
就在这时，很巧嗷。
离心机跑的新一批内容出来了。
陈浩道：“孙教授，数据是不是真的，测一下就知道了。”
蔡卓群立刻上前，打开离心机盖，加入无酶水，溶解。
NanoDrop分光光度计前。
1微升的样本滴入基座。
测量！
屏幕刷新，一排数据跳了出来。
浓度：14.5 ng/ul。
A260/280：1.95。
A260/230：2.03。
孙长明：“啊？”
1.8到2.0是RNA纯度的完美区间。
他引以为傲、耗时四小时、加了各种昂贵试剂才跑出的1.75。
可这个呢？
1.95是什么鬼啊！
“换一管，再测。”孙长明不信邪。
蔡卓群依言换了第二个样本。
浓度：13.8 ng/ul。A260/280：1.92。
第三管。
浓度：15.1 ng/ul。A260/280：1.96。
极其稳定的高纯度，完美的数据重现性，没有任何悬念的绝对碾压。
孙长明，不嘻嘻。
陈浩在旁边补了一刀：“孙教授，你看，四十分钟提出来的，效果是不是比你那个好多了？”
杨煦绷不住了，哈哈大笑：“老孙啊，你那个蛋白酶K水浴一小时的方法，确实挺有创意的，就是费时费力还费钱，没关系，坚持你的想法，相信你一定行！”
孙长明沉默半天，最后也客气的笑道：
“嗯……数据还算凑合吧，不过，不同组织的样本特性不一样，你们这套方法在血清上管用，在我们消化道黏液样本上，未必适用，科研嘛，就是要在不同的方向上多做尝试，加油吧。”
“哎呀，想起来了，我培养箱里的那些细胞还没换液呢，今天就不跟你们多聊了，走了啊。”
他说完，便朝门口走去。
轻轻的他走了，正如他轻轻的来，挥一挥衣袖，不带走一丝云彩~
……
出门。
孙长明伸手捂住胸口，喘不上气。
呃啊，难受啊！
“双重氯仿……糖原……”
孙长明一边扶着墙往研究所走，一边在嘴里反复念叨着这几个词。
“妈的，这小子到底怎么想出来的？这哪来的方法？我什么时候能跟他一起做实验？”
孙教授试图依赖江河。
要不把项目组解散算了，打不过就加入吧？
王教授不都加入学生团队了吗，我就不行？
嗯……现在还来得及吗？
有没有什么优雅的投靠姿势？在线等，挺急的。